アナグマ毒からのトロンビン様酵素アガプリンのサブユニットの分離とアミノ酸残基の配列決定

[要約] 目的 アガクチンの 2 つの類似サブユニットの N 末端 15 アミノ酸残基を決定すること。酵素分子の 2 つのサブユニットを分割して、サブユニットの単一ペプチド鎖を取得し、配列を決定する必要があります。方法 高度に精製されたアガクチンは生化学的方法によって得られた。SDS-PAGE電気泳動分離、サブユニット接着ストリップの回収、およびPVDF膜電気転写技術により、同定および配列決定のための単一サブユニットサンプルを調製しました。後者はエドマン分解法によりサブユニットのN末端の15アミノ酸残基を決定した。【結果】大サブユニット(16kDa)の配列はDCSSGWSSYEEHQYYであり,小サブユニット(15kDa)の配列はDSSGWSSYEGHEYYVであった。結論 配列決定の結果は、NCBI データベースを検索することにより、Agacutin が新しいヘビ毒トロンビン様酵素であることを示しました。